胶质瘤是致癌和侵袭性的脑肿瘤形式，具有对常规放射和细胞毒性化学疗法的抗性;邀请药物发现和药物输送的不断努力。有趣的是，小分子杂交体是一种这样的药效团，由于它们的多能药效而继续引起人们的兴趣。因此，研究人员早先报道了有效的苯乙烯基-肉桂酸酯杂合物及其合理的作用模式的合成。研究人员探索了技术，以推断处理过的胶质瘤细胞中天然和磷酸化蛋白的差异表达景观。基于此，蛋白质-蛋白质通过使用计算工具进行研究并在体外进一步验证。研究人员在此报告，苯乙烯-肉桂酸酯杂合物，一种天然丹酚酸的类似物，改变了涉及翻译，细胞骨架发育，生物能量学，脱氧核糖核酸修复，血管生成和泛素化的关键调节蛋白。细胞周期分析指示停滞以及细胞周期蛋白水平降低;参与进展。研究人员发现，苯乙烯基-肉桂酸酯杂合物通过内在触发代谢物介导的应激来靶向胶质瘤。潜在候选药物缓解的各种肿瘤学回路强烈支持这种药效团作为抗癌药物的作用。虽然杂交在治疗异种移植物或实体瘤方面的进一步分析尚待探索，但他们的候选资格通过这项研究获得了巨大的推动力。本研究使研究人员更好地了解用杂交治疗胶质瘤细胞后蛋白质组学景观的变化。它还允许研究人员在进入临床前研究之前引出这种潜在药物的分子靶点。
　　 胶质瘤是一种侵袭性的脑肿瘤，在基因组和分化阶段都表现出高度复杂的异质性。这已经引发了患者管理和药物发现方面的各种新的修正，目前正面临着一些重要的临床挑战。这种病。其中一些挑战包括：对现有药物的耐药性，主要归因于在各种活化途径和突变基因中存在分子多样性，了解和鉴定患者中一致的分子标记肿瘤的侵袭行为，内部中枢神经系统使外科治疗变得不可行由于分子异质性，目标药物发现在临床上不太相关，尽管不断努力发现各种新的限制各种潜在部分的范围进入大脑，治疗剂量的脑内生物利用度，而不会增加肿瘤内压力自我更新干细胞群，导致耐药性和复发。目前，还没有确定的胶质瘤早期检测工具治疗策略包括使用替莫唑胺作为一线方案进行手术和放化疗。根据对抗胶质瘤药物发现的主要挑战之一的需要，研究人员通过表型筛选探索了小分子竞技场。因此，研究人员早先报道了一系列小的二苯乙烯-肉桂酸酯杂合分子，因为杂交种在靶向脑癌中的作用继续获得巨大的推动，这些苯乙烯基-肉桂酸酯杂化分子的合成，灵感来自天然丹酚酸，是在一锅中实现的，具有更高的产率，其中结构-活性关系提供丙烯酸乙酯作为有效的杂合分子，推导出初步作用模式。同时对正常细胞安全。最近，美国食品和药物管理局的关键路径倡议获得了动力，并促进了解任何潜在候选药物的深入机制的想法。鼓励在分子进入临床试验之前进行该研究，以增加药物成功的可能性，并允许监测潜在的无根据效应。与此相同，虽然已经推断出铅分子的初步作用模式，但确切的作用仍不清楚。系统生物学被用来克服这一挑战，因为它对预测生物细胞行为的影响已被广泛接受。在系统生物学的范围内，选择蛋白质组学是因为它是监测药物治疗反应变化的有力工具，可以将改变的蛋白质鉴定为潜在的药物靶点。
　　 本文中研究人员试图进一步探索基于蛋白质组学的机制，通过这种机制，研究人员的潜在分子可能作用于大鼠胶质瘤细胞。研究人员报告了胶质瘤细胞中蛋白质改变的全局分析研究，从细胞中分离总蛋白，的磷酸-蛋白质过于分离并用于类似地标记的实验。一个相互作用组用差异表达的天然和磷酸化蛋白质制备的。进一步分析了这种相互作用组的特性，并将前蛋白质用于文献研究。随后是一个假设，使用细胞周期分析，克隆形成存活，然后进行免疫印迹和分子对接研究进一步验证。研究人员发现丹酚酸类分子改变了与胶质瘤细胞中蛋白质合成密切相关的重要细胞通路和过程。随着翻译，蛋白质的活动参与泛素化，细胞骨架形成，脱氧核糖核酸修复，血管生成和细胞增殖受到强烈影响。它影响各种信号传导途径并最终导致细胞周期停滞以及较低的克隆形成存活。虽然这是一种分子途径的大杂烩，但这种分子会改变，但它们的进一步验证将使研究人员更多地对抗胶质瘤。该研究进一步增加了丹酚酸类似物对脑癌的细胞毒性潜力，并有助于研究人员了解这些部分在抗癌方面可能面临的潜在瓶颈。
　　收获细胞并使用缓冲液提取总蛋白质。裂解缓冲液中的蛋白质样品原样用于进一步分析;没有任何缓冲交换,在每个样品中定量蛋白质。根据制造商的说明进行消化和标记。这涉及变性，减少和半胱氨酸阻塞随后胰蛋白酶消化进行。消化后，按照制造商的说明书用标记所得肽。用于差异蛋白质组学分析的标记策略如下;合并标记的样品并使用真空浓缩。收集各级分并再次在速度真空下浓缩，脱盐使用拉链法进行所有样品的制备，在样品澄清结束时，对于每个级分，遵循类似的程序以产生磷酸化蛋白质的数据除了它们的富集方法。使用数据库在线完成蛋白质的最终鉴定。鉴定具有置信区间的肽用于鉴定和定量。使用假数据库搜索分析虚假发现率，并使用截止值来识别识别。满足以下四个标准的肽被提前进行分析。首先，用标记肽;其次，肽的离子评分大于评分;第三，它应该是唯一的，第四，肽的特征峰强度落在动态范围之间。为了确定细胞中鉴定的蛋白质的表达比率，总结了每种识别蛋白质的标准化信号。进一步计算蛋白质的比例，值被考虑用于进一步分析。蛋白质被认为是下调的，而高于的蛋白质被认为是上调的。一旦确定了研究中的分子的细胞毒性特征，克隆形成测定法检测即使在处理后仍保持产生后代的能力的那些癌细胞的数量。通过从供体培养物中收获细胞，通过胰蛋白酶消化进行研究，并且在中制备所需的悬浮液，使得细胞接种在必需数量的培养皿中。为了确保细胞的正常生长，用平板补充培养板。同样地，形成的菌落用戊二醛固定，并用结晶紫溶液染色。将板用水冲洗并在室温下干燥。使用软件细胞的集落，并测定存活分数。为了筛选最有效的蛋白质进行功能分析，研究人员进行了相互作用研究。因此，将所有差异捕获的蛋白质的列表喂入字符串中，并选择褐家鼠作为参考动物。这导致研究人员通过进一步分析了一个数据，以便理解五个参数，包括平均最短路径长度，中介中心性，亲密度中心性，聚类系数和学位。在五个参数中，蛋白质之间的程度被认为是最强的，并且前差异表达的蛋白质被提前用于功能分析以便假设可能的作用模式。还选择如此获得的所有这些蛋白质用于对接研究，以便理解研究人员的部分与任何这些蛋白质直接相互作用/结合的强度。
　　研究人员的分析阐明,泛素是最有效的下调蛋白,具有的最高度评分。这是真核生物中一种非常保守的蛋白质，其稳态通过不同基因的协同作用得以维持，这些基因在首次被表征。其功能包括通过蛋白酶体降解靶蛋白，蛋白质运输，细胞凋亡，脱氧核糖核酸修复，细胞周期调控以及信号转导。三种酶负责通过单一单泛素化，多位点单泛素化或多泛素化产生各种不同的泛素化形式的各种蛋白质。它们通过激活，结合和连接的过程将泛素共价连接到各种蛋白质，而泛素通过去泛素化酶再循环。泛素在调节任何细胞内的蛋白质库中的作用强调了其在维持管家功能中的重要性，这些功能最终在包括神经胶质瘤在内的许多癌症中过度活跃。这也可能是由于在病理条件下，如癌症，遍在蛋白化介导的信号传导是长期过度活跃的，以克服升高的细胞应激。由于在肿瘤发生过程中，泛素水平对癌细胞的存活和增殖至关重要，因此其下调将对它们产生强烈的不利影响。与此相同，各种小分子已被开发为胶质瘤中的蛋白酶体抑制剂。随着泛素水平的降低;蛋白质的合成通过翻译的关键细胞教条也受所述的真核翻译延伸因子，真核翻译起始因子和核糖体单位均在下调。翻译过程包括三个部分起始，伸长和终止。在真核生物中，另一方面，伸长过程由规范催化，该三元复合物与核糖体结合，使得位于核糖体的位点，这确保了密码子-反密码子的熟悉程度，现在复合物离开核糖体并被另一种由三种蛋白质组成的复合物激活。作为一个蛋白质伴侣蛋白质的非常规作用已经变得非常重要，包括核输出，蛋白质降解，细胞骨架结合，细胞凋亡以及病毒生命周期。其中一个假设。当细胞受到压力时，水平降低到可用于促进蛋白质降解并最终在凋亡过程中也可能被相同的机制降解的程度。在没有翻译的情况下，蛋白酶体有相互作用，表明其在蛋白质降解中的突出作用。它也被分离为来自盘基网柄菌的肌动蛋白结合蛋白已知它在细胞骨架结合中的作用是进化上保守的。这支持了肌动蛋白，微管蛋白和波形蛋白的数据，因为它们的表达在损伤后也减少了。
　　 磷酸化在确定任何给定点的延伸因子的确切功能中起主要作用，但在研究人员的实验中未捕获其磷酸化。在这方面的进一步研究可能会更好地理解这些延伸因子如何决定胶质瘤细胞的凋亡命运。与现有文献相比，这里出现了对比，因为已知水平在氧化应激下迅速增加，在细胞中，导致细胞凋亡程序的执行，但在研究人员的情况下，这种蛋白质的水平正在降低，仍有细胞凋亡机制通过半胱天冬酶引发。这种矛盾作用的确切原因至今尚不清楚，进一步探讨这将启发研究人员详细的潜在机制。该数据总体上支持这样的假设：分子在很大程度上通过最终引发和延伸过程阻碍了翻译活性。在癌症研究中众所周知，核心信号传导对代谢组学具有深远的影响。由于阻碍了关键的调控信号机制，因此研究人员必须理解其对各种细胞代谢物的影响。令人鼓舞的是，观察到控制糖酵解和循环的某些关键酶也被下调。肿瘤细胞中葡萄糖代谢的改变发现这种现象非常普遍，逐渐形成了基础正电子发射断层扫描。在研究人员的研究中，发现所有这些酶都负责将葡萄糖转化为乳酸，这是胶质瘤细胞中能量产生的优先方式。除糖酵解外，该分子还通过降低二氢硫辛酰转乙酰酶的水平影响循环。
　　 除此之外，还将下调两种酶，其连接糖酵解，氧化磷酸化以及甘油三酯合成。这清楚地表明该分子随着翻译过程减弱了能量产生。一般警告效应的一个论点是其他代谢物的存在，如谷氨酰胺，它也可以通过成为最丰富的氨基酸来控制能量产生。这成为一个值得进一步关注的问题，因为在培养的细胞中氧的可用性不受限制，限制了研究人员得出任何结论的范围。有趣的是，据报道，谷氨酰胺仅仅是导致动脉粥样硬化的原因，表明其作为碳供体而不是作为燃料底物的作用。有趣的是，除了糖酵解外神经细胞凋亡，细胞结构组织以及脱氧核糖核酸修复中起着其他关键作用。众所周知，它是人类胶质瘤中反义基因治疗的关键指标，其升高的表达被发现负责对吉西他滨和多柔比星在肺癌中通过核限制和预防端粒缩短。随着翻译和糖酵解，蛋白质的减少也有助于研究人员推断出由研究人员的分子触发的关键信号传导途径之一，以确保胱天蛋白酶依赖性内在的细胞凋亡死亡。并通过充当蛋白质折叠机制维持细胞稳态。据报道，其上调与肝脏和结肠癌内多种药物的肿瘤发生增加有关。微管蛋白形成这种复合物的底物，据报道，结果表明，这种应激引发蛋白质降解以及线粒体破坏和凋亡半胱天冬酶的过度活化。由于研究人员的分子正在减少这两种蛋白质，它们相对较低的水平可能最终导致这种相互作用的破坏，从而通过途径和蛋白质降解引发细胞凋亡。此外，值得一提的是，与微管蛋白一起，还有肌动蛋白和波形蛋白细胞骨架蛋白的减少，其中波形蛋白作为促进肿瘤进展的上皮-间质转化的准确标记。维持质膜完整性的蛋白质。可通过阻止线粒体易位和通过增加细胞运动支持血管生成的细胞来预防细胞凋亡也各自减少;使胶质瘤细胞无法增殖。
　　 与下调的蛋白质一起，研究人员还获得了上调的蛋白质。有趣的是观察到虽然基础管家信号似乎有所减少，从而允许神经胶质瘤细胞在小鼠脑中迁移和侵袭。通过蛋白酶体亚基上调使蛋白质降解装配体保持活性以进行蛋白质降解。磷酸核糖焦磷酸合成酶相关蛋白与核苷酸，辅因子和氨基酸的合成相关的重要蛋白质也被上调。最终，研究人员的分子确实影响细胞骨架和翻译水平，但不能影响一些基本合成和侵入机制，这可能是限制在临床前研究中使用此类分子的瓶颈之一。在研究人员的研究中可以鉴定的唯一上调的磷酸化蛋白是磷酸-血管生成抑制素结合蛋白。总之，蛋白质组学研究表明，分子影响与细胞死亡和增殖有关的机制的。因此，研究人员首先进行细胞周期分析，其中研究人员试图了解研究人员的分子将发挥其最大作用的确切阶段，其次，测量克隆生存以检测刺激生殖完整性丧失的有效性。该观察结果与翻译和细胞骨架蛋白质降解的预期下游结果一致。通过蛋白质印迹进一步验证了这一点，还评估了某些表达，并且在损伤后它们的表达没有太大变化。有趣的是，在细胞周期停滞中的突出作用。为了确认翻译水平上的作用，研究人员还试图了解它是否在转录水平上具有任何调节作用。同样，使用研究了与细胞周期和增殖相关的几个关键基因，并且发现其倍数变化水平没有太大变化。在蛋白质印迹中不能检测到某些细胞周期蛋白的水平，但是它们的水平仍然没有反映出足够的倍数变化。这清楚地表明细胞周期内;在转录水平上可能起较小的作用，并且更多地控制翻译活动。