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木犀草素

  在黄酮类化合物中木犀草素是一种已在许多植物中鉴定出的黄酮。众所周知它的细胞凋亡可能导致脱氧核糖核酸损伤和细胞周期阻塞。许多研究表明木犀草素具有抗氧化,抗炎和抗癌活性。然而众所周知热处理煮沸,烹饪和用微波处理会影响黄酮类化合物的结构,这通常会导致其活性发生变化。本研究旨在研究加热的木犀草素对胶质母细胞瘤细胞的抗肿瘤活性的影响。通过测定评估胶质母细胞瘤细胞活力。对不同的蛋白质基质进行粘附测定,通过改良的室和视频显微镜确定迁移测定,最后通过在上形成毛细血管网络在体外测试血管生成。获得的结果表明,热处理显着降低了其细胞毒活性和抑制细胞与不同蛋白质基质粘附的能力。还发现热处理显着降低了木犀草素抑制细胞迁移,细胞侵袭和内皮细胞血管生成的能力。这表明热处理的木犀草素具有比天然木犀草素更低的抗肿瘤潜力。胶质瘤是一种从脊柱或大脑开始的肿瘤占所有恶性脑肿瘤。根据不同的因素如国家年龄和组织学类型,虽然神经胶质瘤具有相对较低的发生率可以确保高死亡率和发病率。根据世界卫生组织分类,胶质瘤分为低级和高级肿瘤。其中毛细胞星形细胞瘤是非侵入性的主要发生在儿童中胶质瘤包括少突神经胶质瘤星形细胞瘤称为胶质母细胞瘤。尽管采用了先进的方法,如放射治疗化疗及其组合,胶质瘤的愈合频率非常低,几年生存率也很低。胶质瘤的特征在于过度增殖,血管生成升高和持续侵入周围脑组织。由于这些原因有必要研究胶质瘤的分子机制并开发分子的新治疗用途。科学报告证明药用植物是生物活性化合物的丰富来源,可用于治疗各种疾病包括某些类型的癌症。对黄酮类化合物的一些研究揭示了抗肿瘤发生药物发现的主要发展,其具有通过细胞凋亡诱导杀死癌细胞的潜力。木犀草素是在中发现的黄酮和许多其他植物。通过包括脱氧核糖核酸损伤和细胞周期停滞已知其在人肺鳞状细胞癌细胞中的凋亡潜力。此外还报道了木犀草素具有抗氧化抗癌自由基清除剂和抗炎特性。另一方面热处理,例如煮沸微波蒸煮和油炸可以降低类黄酮含量。此外植物的热处理通常与改进的抗氧化活性相关。一些研究表明来自植物的原料比加热材料具有更高的自由基清除活性。然而一些研究人员已经确定了降解后黄酮类化合物的新产品因为它们在高温下结构不稳定。提出了在氧气条件下热处理过程中槲皮素的降解途径还有已经确定了芦丁,槲皮素和圣草酚的热降解。然而热处理后黄酮类化合物的生物学效应仍然有限。该研究通过研究使用内皮细胞血管生成研究细胞对细胞生长,粘附和迁移的影响以及对血管生成的影响,研究了木犀草素的热处理如何影响其抗肿瘤潜力。
   用胰蛋白酶消化细胞,然后以低汇合度接种在纤连蛋白预包被的孔板上。在进行细胞迁移然后使用倒置尼康显微镜以十倍放大率进行。细胞电镀后几小时开始延时记录。使用由元件软件操作的照相机对每个孔的四个视野进行成像并在几小时内以五分钟的间隔进行跟踪。如前所述使用肿瘤相关巨噬细胞图像分析软件进行单细胞跟踪。从每个单独的单元计算的迁移参数包括总迁移距离,到原点的距离,方向持久性和细胞迁移的速度。总迁移距离表示在几小时内每五分钟记录的距离总和到原点的距离被确定为初始位置和最终位置之间的净易位。速度计算为总迁移距离除以几小时。定向持久性计算为距离与原点距离与总距离偏移的比率。三维细胞侵袭测定将细胞用胰蛋白酶消化计数,并在含有甲基纤维素的完全培养基中以多个细胞重悬。将细胞悬浮液加入到孔板的底孔中允许每孔形成一个球状体。铺板两天后,收获球状体并嵌入胶原蛋白中。将平底孔板的孔用牛胶原蛋白的混合物和补充有甲基纤维素的培养基包被。然后将单个球状体嵌入相同的混合物中。一小时后在顶部加入培养基。将测试的样品直接添加到涂层,包埋溶液和覆盖的培养基中。在嵌入拍摄照片。通过使用软件测量细胞占据的面积来量化入侵。结果来自至少三次独立实验。所有值均表示为平均值±标准差,并且使用软件和通过单向测试确定实验组之间差异发现的统计学显着性统计显着性用星号值表示。
   通过使用测定在多小时内测量人胶质母细胞瘤细胞活力来估计木犀草素的毒性。研究人员的研究结果表明,木犀草素处理以浓度依赖性方式显着抑制胶质母细胞瘤细胞的生长,然而,通过加热木犀草素降低了这种细胞毒性,因此研究人员可以得出结论,加热的木犀草素的细胞毒性显着低于上的天然木犀草素。对于生长,大多数细胞类型需要附着到基膜上。由于木犀草素和加热的木犀草素具有针对细胞的细胞毒性效力,因此研究了它们对细胞附着的抑制作用。通过使用不同的纯化蛋白进行细胞粘附测定。天然木犀草素特别是抑制与纤连蛋白的粘附玻连蛋白胶原。该抑制是剂量依赖性的,另一方面与天然木犀草素相比,加热的木犀草素在阻断不同蛋白上的细胞粘附方面似乎效率较低。虽然天然既不加热也不木犀草素对细胞粘附到整联独立基质聚赖氨酸的任何作用,这表明该作用被关联到抑制粘附受体整合素家族的。细胞迁移可以被认为是精细调节的过程包括细胞粘附和去粘附的连续步骤。由于木犀草素和加热的木犀草素抑制细胞粘附,因此在改良的室中使用测定法研究它们对细胞迁移的影响。木犀草素以剂量依赖性方式阻断细胞迁移。木犀草素的热处理减弱了这种作用,因此天然木犀草素在减少细胞迁移方面显着更有效。
   第二次使用时间推移视频显微镜对纤连蛋白进行随机二维运动性测定。该技术可以更准确地识别可能受影响的迁移参数。出了在几小时期间几个单元的代表性迁移路径。它们清楚地表明木犀草素加热显着降低纤维连接蛋白细胞运动性。木犀草素并加热木犀草素减少两个距离原点和移动速度。因此这两种分子受影响的细胞的定向持久性,然而与加热的木犀草素相比,天然木犀草素仍然是最有效的。研究了木犀草素和加热的木犀草素消除人胶质母细胞瘤细胞球体侵袭胶原凝胶的能力。在用样品处理几小时后测量对细胞侵袭的影响。甚至在所测试的最低浓度木犀草素细胞的完全消除侵袭,而加热的木犀草素是低效率的。胶质瘤在邻近组织中诱导广泛的新血管形成。因此通过跟随毛细血管样结构形成研究了木犀草素和加热的木犀草素对微血管内皮细胞系内皮细胞血管生成的影响。报告的结果表明,用木犀草素和加热的木犀草素处理强烈地抑制了小管形成,天然木犀草素比加热木犀草素显着更有效。如今消费者公共卫生组织和医疗界都有兴趣通过饮食方式增强健康。几种蔬菜经过各种热处理方法,它们在水中煮沸在较高温度下烘烤或油炸,以便在人体消化系统中更好地消化和良好的新陈代谢,此外食物热处理对于灭活由病原体引起的疾病和降低水分含量是必要的。
   通常食物烹饪方法被认为是破坏生物活性化合物的主要因素之一,其可能触及其抗氧化能力。然而酚类化合物降解的主要原因是通过在热处理下氧化或裂解共价键而产生的。实际上,氧化速率取决于许多加工条件温度氧气可用性和水活度。此外在弱碱性和氧化条件下槲皮素强烈降解,导致水溶液热处理后抗氧化活性降低。似乎还研究了水溶液模型系统,弱碱性和氧化条件下芦丁和槲皮素的降解。另一项研究表明加热时间的增加导致芦丁的损失率更高。另外据报道在热处理几小时后,木犀草素含量在温度下降低另一方面证明了黄酮类化合物的降解取决于活化能,这是破坏共价键所必需的。根据文献,许多天然植物提取物及其黄酮类化合物在体内和体外都含有显着的抗癌特性。木犀草素是主要代表性黄酮类化合物之一,存在于许多类型的药用植物水果和蔬菜中,并且已被发现具有抗癌活性。这可能对黄酮类化合物的结构和生物活性产生影响。在本研究中人胶质母细胞瘤细胞用于研究和比较木犀草素和加热的木犀草素的抗肿瘤特性。许多研究表明木犀草素具有抗许多人类癌症细胞系,如甲状腺癌细胞系,乳腺癌细胞和人肝癌细胞。此外据报道木犀草素对胶质瘤细胞具有显着的剂量时间依赖性抗增殖作用。研究还表明,木犀草素对癌细胞的侵袭性表型具有抑制作用。它还通过增加钙粘蛋白的表达同时降低整合素的表达来消除前列腺癌细胞恶性黑素瘤细胞的侵袭。整合素在粘附过程中发挥重要作用,通过将细胞与蛋白连接并诱导参与细胞增殖和转移调节的细胞内信号传导途径的激活。该研究表明天然木犀草素和加热的木犀草素能够抑制人胶质母细胞瘤细胞与纤连蛋白,玻连蛋白和胶原蛋白的粘附,但它们对细胞与整联蛋白非依赖性基质聚赖氨酸的附着没有任何影响,这表明两种化合物都可以通过整合素依赖性机制起作用。
   证明细胞可溶性因子之间的动态相互作用是必不可少的。事实上整联蛋白是的主要受体因此是细胞运动所必需的。木犀草素和加热的木犀草素对整联蛋白的抑制与在测定中细胞向纤连蛋白的迁移的损害有关。木犀草素还显示通过改良的划痕试验抑制胶质瘤细胞迁移。研究人员的结果表明,木犀草素和加热的木犀草素对细胞迁移的影响是由于细胞速度的降低和定向持续性的降低。这与别人报道的结果一致。另一种类型的黄酮类。作者证明七叶苷及其低聚物部分通过降低细胞速度而不改变持久性来消除人胶质母细胞瘤细胞的侵袭和迁移。内皮细胞接种在上扩散并相互结合,形成具有多中心连接的分支管,从而形成毛细血管状结构的网状结构。研究人员的研究结果表明木犀草素和加热的木犀草素能够影响细胞形成毛细管样管的能力。该结果与显示一些天然分子例如香豆素或七叶苷具有抗血管生成活性的研究一致。另一方面与天然分子相比热处理降低了对人胶质母细胞瘤细胞的抗肿瘤活性。一些研究表明热处理降低了黄酮类化合物的抗氧化能力。但与研究人员的结果不一致,它也证明了柚皮素的热处理增强了免疫细胞中的细胞抗氧化活性并保持了柚皮素的抗炎功能,这解释了柚皮素具有稳定性高温。因此相同天然食物的加热过程是改变植物化学分子特征的一个因素植物化学分子通过降低或改善其营养价值来影响它们的生物活性。总之本研究的发现证实木犀草素可被认为是一种多功能剂,可减少细胞粘附迁移和人胶质母细胞瘤细胞的侵袭并抑制血管生成。此外研究人员发现高温改变了木犀草素的生物活性,并显着降低了这种黄酮类化合物的效率。加热和天然木犀草素之间活性的显着差异可以与其对热处理敏感的结构相符。需要进一步研究以通过靶向细胞信号传导途径来确定分子机制。

 
 
胶质瘤
  胶质瘤是颅内最常见的恶性肿瘤,发病率占颅内原发性肿瘤的50%,居第1位,多见于成人,好发部位以额叶、颞叶、顶叶居多。胶质瘤患者男性发病率高于女性,发病年龄以成人多见,30~40岁为发病高峰年龄。不同病理类型的胶质瘤各有其高发年龄,室管膜瘤的高发年龄在10岁以前,星形细胞瘤多见于中年人,老年人以胶质母细胞瘤多见。
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