CSPG4/NG2在胶质瘤免疫抑制治疗中的研究进展

　　软骨素蛋白聚糖4（chondroitinsulfateproteoglycan4，CSPG4）是软骨素蛋白聚糖大家族中的一员，由关键蛋白质和软骨素主链构成，存有于人体正常机构中，对体细胞的生长发育、粘附、转移等有关键功效。CSPG4最开始发觉在黑素瘤中高表述，也称之为黑素瘤蛋白质含糖量（melanomaproteoglycan，MPG）。大白鼠身体存有CSPG4同宗蛋白质的神经细胞胶原蛋白抗原（neuron-gliaantigen2，NG2），诸多有关CSPG4构造和作用的报导是根据对啮齿类NG2的科学研究。CSPG4在一切正常机构中的表述受到限制，而在恶性肿瘤机构尤其是在颈静脉体细胞活跃性的肿瘤微环境中展现高表述状况，另外也在不一样试管胚胎发源的恶性肿瘤特殊祖细胞分裂全过程中表述，这一特点使CSPG4合适做为治疗恶性肿瘤的靶标。CSPG4在恶性肿瘤机构中的高表述会推动恶性肿瘤细胞的增殖、毛细血管产生、抗药性、免疫逃逸和对放射性治疗的抵御等。文中就CSPG4的分子生物学特性以及在胶质瘤中的自身免疫病治疗研究成果开展具体描述。

　　1.CSPG4、NG2的基础构造

　　CSPG4是由15号性染色体上的CSPG4基因编码的一次Ⅰ型跨膜蛋白，一般 以一个约255kD的糖蛋白或455kD的蛋白质含糖量表述。其关键蛋白质包含3个结构域：222五个碳水化合物组成极大的体细胞外区，25个碳水化合物构成的跨膜区和76个碳水化合物构成的体细胞内区。体细胞外区又分D1、D2、D3，D1子域是挨近N端球形结构域，由2个G型层粘连蛋白质构成，靠二硫键保持其三级构造。D2子域由15个反复的CSPG二级结构构成，NG2中一些CSPG立即联接胶原Ⅴ和Ⅵ，有一些CSPG是软骨素主链（chondroitinsulfate，CS）装饰的潜在性联接结构域。

　　挨近细胞质的D3子域是球形构造，其包括好几个糖分的装饰结构域，可潜在性融合半植物凝集素3和别的植物凝集素，也有整合素α3β1。D3子域还包括一些蛋白质核糖核苷酸融合结构域，能使其从体细胞表层释放出来。跨膜区包括一个特别注意的胱胺酸残基，很有可能和CSPG4在体细胞表层的精准定位相关，可是也有待进一步试验认证。胞内区羧基尾端的4个蛋白质含糖量残基组成一个联接在二级结构上的PDZ构造，这一构造可与线蛋白质（MUPP1和GRIP1）的PDZ构造紧密结合。胞内区还带有好多个潜在性的苏氨酸磷酸化融合结构域，可各自根据PCKa、ERK1、ERK2方式（NG2的磷酸化结构域T2256/T2314和CSPG4的磷酸化结构域T2252/T2310）开展磷酸化。

　　在羧基尾端有一个含有缬氨酸的地区，很有可能进一步受体蛋白质中间的相互影响，可是也有待认证。

　　2.CSPG4在胶质瘤自身免疫病治疗中的研究成果

　　2.1网织红细胞受体的自身免疫病

　　在细胞毒性网织红细胞中，NK体细胞是最有效的抗癌体细胞，可在沒有抗原依靠的状况下立即消灭肿瘤干细胞，目前研究表明：NK体细胞能调整恶性肿瘤非特异的细胞毒性T淋巴细胞表述，还能诱发辅助T淋巴细胞（TH1）因素在恶性肿瘤中的表述。根据细胞因子代谢，NK体细胞的激素调节工作能力能够使恶性肿瘤有关巨噬细胞从“抗感染”向“促炎”歪斜，提升恶性肿瘤的免疫系统编写工作能力。胶质瘤超出70%的恶性肿瘤有关体细胞偏重于推动恶性肿瘤细胞的增殖的M2燃气表，而NK体细胞的这种特点对胶质瘤免疫系统治疗的取得成功尤为重要。运用NK体细胞释放出来的细胞因子使免疫系统机构由“抗感染”向“促炎”变化的特点，把NK体细胞和CSPG4/NG2的单抗mAb9.2.27二者融合来诱发抗原依靠的细胞毒性效用，以进一步探寻NK体细胞的治疗发展潜力。

　　被激话的NK体细胞能够代谢与胶质瘤有关的干扰素栓（IFN-γ）和恶性肿瘤萎缩因素（TNF-α）。而IFN-γ能激话中枢神经系统的小胶质细胞，小胶质细胞在中枢神经系统中等同于巨噬细胞的功效，能消灭胶质瘤体细胞进而抑止肿瘤生长，在这里一全过程中mAb9.2.27对恶性肿瘤破坏力实际效果沒有明显危害。而TNF-α对胶质瘤的破坏力功效并不确立，由于胶质瘤能根据提高PI3K/AKT和NFκB数据信号传输来抵御TNF-α对肿瘤干细胞的破坏力。CSPG4/NG2能够做为肿瘤干细胞有关抗原体（tumor-associatedantigens，TAA），非特异鉴别TAA的T体细胞做为恶性肿瘤靶标获得巨大关心。伴随着单抗技术性的发展趋势，T体细胞受体的淋巴系统造成非特异鉴别CD19的抗原受体嵌合（chimericantigenreceptor，CAR），可能对肿瘤的治疗造成重特大危害，已经证实该治疗法在黑素瘤治疗层面的作用。因CSPG4在胶质瘤的普遍表述，未来也可运用于胶质瘤做为嵌合体抗原受体T体细胞免疫治疗（CART）的治疗靶标。

　　带上CSPG4遗传基因的嵌合体抗原受体转导的T体细胞能造成多种多样细胞因子，如TP41.2转导的T体细胞和LN443系恶变胶质细胞一同塑造，能够造成3种细胞因子：IFN-γ、TNF-α和粒细胞集落刺激性因素（GM-CSF），这种细胞因子非特异破坏力表述CSPG4的肿瘤干细胞。

　　2.2CSPG4/NG2抗原受体的免疫系统治疗

　　单抗Mab是对于专一的抗原决定簇造成的抗原，与基本抗原对比，具备非特异强、敏感度高、不良反应小等优势。以CSPG4/NG2为靶标生产制造的单抗能非特异鉴别高表述CSPG4/NG2的肿瘤干细胞。新生儿毛细血管的产生是肿瘤的关键特点，也是促进肿瘤生长和外扩散的关键要素。周细胞是在肿瘤微环境中活跃性表述的体细胞，在胶质瘤新生儿毛细血管中，CSPG4/NG2的单抗mAb2164H5与Ⅳ型胶原可并排置入到毛细血管周边质膜的周细胞，而mAb2161F9是对于恶性肿瘤毛细血管内腔周细胞的单抗。根据抗原和抗体融合抑止周细胞特异性，能合理抑止恶性肿瘤毛细血管产生，抑止肿瘤生长和迁移，也有多种多样作用类似的单抗如mAb2161D7、mAb2168G4等，而2161D7/Glut-1、2168G4/Glut-1关键对于分散化在恶性肿瘤机构中的肿瘤干细胞。CSPG4在体细胞内的数据信号传送全过程中起关键功效，能激话ERK和FAK等体细胞内数据信号方式，而这种数据信号传输方式与恶性肿瘤的生长发育和迁移息息相关。

　　scFv-FcC21是一种非特异鉴别人们CSPG4的多肽链抗原，对胶质瘤、黑素瘤、骨肿瘤、败血症等肿瘤均有非特异抑制效果，其对胶质瘤的抑止可能是根据影响CSPG4在恶性肿瘤数据信号传输中的功效，进而抑止恶性肿瘤在身体及身体之外的繁衍和迁移。研究发现：ScFv-FcC21与CSPG4基因敲除的肿瘤干细胞无显著反映，与CSPG4呈阳性表述的体细胞可产生免疫沉淀，说明ScFv-FcC21对CSPG4阳性细胞的非特异抑制效果。

　　2.3遗传基因治疗

　　遗传基因治疗就是指将外源性一切正常遗传基因导进靶细胞，以改正基因缺陷或出现异常造成的病症，而胶质瘤恰好是因为CSPG4/NG2遗传基因出现异常表述造成恶性肿瘤细胞的增殖、转移。表述CSPG4的胶质瘤对放化疗有更强的抵抗能力，且能首先激话体细胞有丝分裂的G1、G2结构域解决DNA损伤。重组人氯丁二烯还原酶（PRDX-1）和CSPG4遗传基因在胶质瘤体细胞中表述均上涨，用shRNA敲除U251中的PRDX-1，NG2的表述会显著遭受危害，表述CSPG4的胶质瘤体细胞有丝分裂的G2期要因PRDX-1的敲除而终止，U251的抗放化疗工作能力会显著降低。

　　在身体之外和身体的科学研究中，CSPG4基因敲除的肿瘤干细胞会变弱β-1整合素的数据信号